بررسی اثر آللوپاتیکی برخی گیاهان دارویی بر جوانه‌زنی و رشد انگل سس (Cuscutsa campestris Yuncker)

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 گروه علوم باغبانی و زراعی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

2 گروه علوم و مهندسی باغبانی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز، تبریز، ایران

3 گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز

چکیده

اهداف: پژوهش حاضر به منظور بررسی خاصیت آللوپاتی برخی گیاهان دارویی بر جوانه‌زنی و رشد بذر انگل سس اجرا شد.
مواد و روش‌ها: در مرحله اول 18 گیاه کشت شده در باغ گیاهان دارویی با بذر سس، آلوده و میزان آلودگی یا مقاومت در برابر این انگل بررسی شد. سپس تعداد 7 گیاه انتخاب شده کشت و آلوده‌سازی صورت گرفت. در بخش دیگر آزمایش از 4 گیاه دارویی مقاوم در برابر سس، دو نوع عصاره آبی و هیدروالکلی تهیه و در 4 غلظت بصورت کشت در پتریدیش بر جوانه‌زنی بذور، مورد آزمایش قرار گرفتند. آنالیز اسانس گیاهان دارویی مورد آزمایش، توسط دستگاه کروماتوگرافی گازی-طیف سنج جرمی صورت گرفت. میزان فنل و فلاونوئید عصاره‌ها نیز مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته‌ها: از بین گیاهان مورد آزمایش بابونه و رازک نر آلودگی 100 درصد و بیشترین مقاومت در برابر آلودگی سس را گل محمدی، پایه ماده رازک، زوفا و مریم گلی نشان دادند. از عصاره‌های استفاده شده، عصاره هیدروالکلی و آبی با غلظت 15 درصد گل محمدی و رازک بیشترین تاثیر بازدارندگی را بر جوانه‌زنی بذور سس نشان‌ دادند. میزان فنل و فلاونوئید کل نیز در عصاره هیدروالکلی این دو گیاه بیشترین میزان را داشت.
نتیجه‌گیری: عصاره هیدروالکلی گل محمدی و رازک موجب بازداری از جوانه‌زنی سس شده و همچنین کشت این گیاهان در اطراف باغ‌ها و مزارع می‌تواند مانع گسترش بیشتر سس شود.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Investigation of allopathic effect of some medicinal plants on germination and growth of dodder (Cuscutsa campestris Yuncker)

نویسندگان [English]

  • Naeeme Molaei kordabad 1
  • Saeideh Alizadeh-salteh 2
  • Marzie Ghanbari Jahromi 1
  • Moosa Saber 3
1 Science and Research Branch, Islamic Azad University
3 University of Tabriz
چکیده [English]

Background and Objective: The present study was performed to investigate the allelopathic properties of some medicinal plants on the growth, propagation and germination of sauce parasite seeds.
Materials and Methods: In the first stage, 18 plants cultivated in the garden of medicinal plants were infected with sauce seeds and the degree of infection or resistance to this parasite was investigated. Then 7 selected plants were cultured and infected. In the other part of the experiment, 4 types of aqueous and hydroalcoholic extracts were prepared from 4 dodder-resistant medicinal plants and tested on seed germination in 4 concentrations by culturing in pteridish. Essential oil analysis of the tested herbs was performed by gas chromatography-mass spectrometry. The levels of phenol and flavonoids in the extracts were also evaluated.
Results: Among these plants, chamomile and male hops showed 100% contamination and most cultivated plants showed no contamination. Among the cultivated plants, Rosa, hops, hyssop and sage showed the highest resistance to contamination of the sauce. Among the used extracts, hydroalcoholic and aqueous extracts at a concentration of 15% of rosemary and hops showed the greatest inhibitory effect on germination of sauce seeds. The amount of phenol and total flavonoids in the hydroalcoholic extract of these two plants was the highest.
Conclusion: Hydroalcoholic extracts of rosemary and hops prevent the germination of the sauce and also cultivation of these plants around gardens and fields can prevent further spread of the dodder.
Key words: Cuscuta, hydroalcoholic extract, aqueous extract, Humulus, Rosa damascena

کلیدواژه‌ها [English]

  • Cuscuta
  • hydroalcoholic extract
  • water extract
  • Humulus
  • Rosa damascena

 

مقدمه

سس با نـام علمـی Cuscutsa campestris Yuncker گیـاهی است یکساله کـه بـه خـانواده Cuscutaceae تعلـق دارد. سس یک گیاه انگل غیراختصاصی اسـت کـه از طریق اندام­های مکنده خود به بافت­ها و سیستم آوندی گیـاه میزبـان نفوذ و به علت بهره‌برداری از آب، مواد معدنی و مواد فتوسنتزی، باعث کاهش رشد گیـاه میزبـان شـده (نادلر-حسن و روبین 2007) و بسته به گیاه میزبان می‌تواند عملکرد آن را بین 30 تا 50 درصد کاهش‌دهد (راشد محصل و همکاران 2002).

سس از طریق بخشی از دیواره سلول که پکتینی است، بـه میزبان متصل  و طی چند روز مکینه‌های خـود را وارد آونـدهای آبکـش میزبان کرده و تشکیل مکینه با تورم سلول­هـای سـاقه سـس و در نزدیکترین محل به میزبان صورت می‌گیرد و تعدادی از سلولهای اپیدرمی سس تقسیم‌شده و رشد می‌کنند. دیواره این سلول­ها انعطاف‌پذیر است، که پس از ترشـح آنـزیم، لایه‌های سلولزی ساقه میزبان را تجزیه و به آن نفوذ می‌کند (ووگن 2002). ارتباط مکینه با آوندهای آبکش میزبان از طریق پلاسمودسماتا برقرار و در نهایت، امکان جذب مواد توسط سس فراهم می‌شود. مخزن سس از قدرت رقابت بالایی برای جـذب مـواد فتوسـنتزی برخـوردار بوده که با رشد سس، حمایت میزبان از انگل به دلیل تولید اندام­های بیشـتر و تداوم اتصال، ادامه می‌یابد. تغییر مسیر مواد فتوسنتزی و انتقال آن­هـا از میزبـان بـه انگل، زمینه پیری زودرس و رشد ضعیف گیاه میزبان را فراهم مـی‌کنـد (هالوی 1989).

به علت ارتباط تنگاتنگ سس با میزبان، استفاده از علفکش­های کاملا انتخابی برای تخریب سس (بدون خسارت به میزبان) ضروری است. علفکش­های سس که بصورت خاکی مصرف می شوند، بر حسب زمان مصرف، به دو دسته پیش از اتصال به میزبان و  پس از اتصال به میزبان تقسیم می‌شوند. تـاثیر علفکش­های خاکی بـه دلیـل کـاهش شـدت تعـرق و انتقـال مـواد در آوندهای چوبی سس، کمتر است. بـا توجه به اینکه سس مخزنی قدرتمندتر از گیاه میزبان است، به نظر می‌رسد علفکش­هـایی کـه در آوندهای آبکش انتقال می یابند (مانند گلایفوسیت) منجر به کنترل بهتر سس می‌شوند (نیر و همکاران 1996).

اصلی‌ترین راهکار مدیریت علفهای هرز، کنترل شیمیایی توسط علفکش­ها می‌باشد و در طی 26 سال گذشته تولیدات زراعی به شدت به علفکش­ها و آفتکش­های مصنوعی وابسته شده‌اند (اوهنو و همکاران 2008). این وابستگی منجر به آلودگی منابع آب‌های سطحی و زیرزمینی شده  (ایندرجیت و اولسن 2003) و علاوه بر این­ها افزایش مقاومت علفهای هرز به علفکش‌ها، لزوم کاهش هزینه نهاده‌ها و نیز عوارض زیست‌محیطی و خطرات احتمالی برای سلامت بشر، موضوع کاهش مصرف سموم در کشاورزی را مطرح نموده‌است (دایان و دوک 2014).

بـا توجـه بـه مشـکلاتی کـه علـفکـش­هـای شیمیایی در کنترل علفهای هرز به همراه دارنـد، اسـتفاده از توانـایی آللوپاتی یا دگرآســیبی گیاهــان زراعــی بــه عنــوان روش جــایگزین شــناخته می‌شود (گلیسمن 2001).

رایس (1984) آللوپاتی را هر گونه اثر مضر یا مفید مستقیم یا غیر مستقیم یک گیاه بر گیاه دیگر، تعریف می‌کند که عموماً از طریق تولید ترکیبات ثانویه از راههای مختلف نظیر آبشویی از سطح اندامها، ترشحات ریشه‌ای، تبخیر و تجزیه بقایای گیاهی ایجاد می‌شود.

دگرآسـیبی یکـی از روابـط مسـتقیم تـداخل بـین گیاهـان بـوده و به طور کلی بر اساس تولید ترکیبات بیوشیمیایی پیچیده و سمی بیـان مـی‌شـود (موریس و همکاران 2009) و می‌تواند جهت کاهش جمعیت علفهای هرز مورد استفاده قرار گیرد. با توجه به اینکـه نگرانـی‌هـای اکولـوژیکی و زیسـت‌محیطی که با مصرف علفکش‌های شیمیایی بـه وجـود آمـده‌اسـت، منجر به افزایش توجه به کشاورزی پایدار شـده (ناروال و همکاران 2005)، لزوم عدم استفاده از علفکش‌های شیمیایی در نظام­های کشاورزی پایدار (والاس 2001) معرفی علفکش‌های زیستی جهت کنترل علفهای هرز به‌ویژه سس می‌تواند به توسعه بیشتر  نظامهای پایدار کمک کند (ماکادو 2007).

یکی از گزینه‌هـای مناسب، بهره‌گیری از پتانسیل آللوپاتی گیاهان دارویی بوده و بهـره‌گیـری از پتانسیل آللوپاتی گیاهان دارویی و کشت ارقام متحمـل بـه علفهای هرز نیز اهمیت زیادی در مدیریت غیـر شـیمیایی دارد، زیـرا منجر به کاهش مصرف نهاده‌هـای شـیمیایی و افـزایش تنـوع زیـستی می‌شود (میغانی و همکاران 2007).

اندامهای مختلف گیاهان دارویی از جمله ساقه، برگ و ریشه، ترکیبات شیمیایی وارد خاک می‌کنند که بازدارنده رشد برخی از علفهای هـرز هـستند و ترکیبات ثانویه موجود در اندامهای مختلف گیاهان دارویی از جمله ساقه، برگ و ریشه، شامل آلکالوئیدها، ترپنوئیدها، ترکیبات فنلی (نظیر تاننها، مواد تلخ، فلاونوئیدها، فلاوونها)، اسانس­ها، گلیکوزیدها و ... می باشد (امیدبیگی 1376). ترکیبات آللوپاتیک، رشد و نمو گیاهان را از طریق تداخل در فرآیندهای مهم فیزیولوژیک، همچون تغییر ساختار دیواره سلولی، نفوذپذیری و عمل غشاء سلولی، جلوگیری از تقسیم سلولی و فعالیت برخی آنزیم‌ها، تعادل هورمون‌های گیاهی، جوانه‌زنی بذور و لوله گرده، جذب عناصر غذایی، فتوسنتز، تنفس را مختل می‌سازند (زیگلر 1996). 

گزارش‌های مربوط به اثر تراوش‌های آللوپاتیکی بر سس محدود می‌باشد و عصاره اندامهای برخی از گونه‌های سس خاصیت آللوپاتی داشته و مانع جوانه‌زنی و رشد سایر گونه‌ها می‌شوند مولن و همکاران (1969)  گزارش کردند که سینئول، دایپینن و ترپن­های فرار در برگ گیاه مریم گلی (Salvia leucophylla)  تراوایی غشاء سلولی را کاهش می‌دهد. جعفری (1992) توانایی دگرآسیبی گیاه پونه‌سا (Nepeta cataria) را بر جوانه‌زنی بذرهای سس بررسی و اعلام کرد که عصاره های گل، برگ و ساقه این گیاه جوانه‌زنی بذرهای سس را به طور معنی‌داری کاهش‌داده و عصاره‌های آبی برگ و گل مؤثرتر از عصاره بدست آمده از سایر قسمت­ها می‌باشند (جعفری 1992). تحقیقات متعددی در جهت اثبات اثرات آللوپاتیکی گونه‌های مختلف درمنه نیز انجام شده‌است (پرستون و همکاران 2002).

اسانس و عصاره گیاهان دارویی منجر به تاخیر در جوانه‌زنی و رشـد گیاهچـه هـای بسـیاری از  علف­های هرز شده ‌است (امیری و همکاران 2010).  گزارش‌هـای متعـددی از اثـرات دگـر آسـیبی گیاهـان مختلـف بـر  جوانه‌زنی و رشد گیاهچه بذرهای مختلف وجود دارد، آرمیناتـه و همکـاران (2006) گـزارش  کردند اسانس مریم گلی منجر به کاهش درصد جوانه‌زنی و رشد گیاهچه­های تربچه وحشی، کاهو و قدومه می‌شود. استفاده  از عصاره گیاه دارویی بومادران در کاهش جوانه‌زنی و رشد گیاهچه علف­های هرز تاج خروس و سـلمه تـره گـزارش  شده‌‌است (علیپور و همکاران 2012). در تحقیقی اثر آللوپاتی گیاه سداب بر جوانه‌زنی بذر علف­های هرز فرفیون، اویارسـلام و خرفـه گـزارش‌شـده ‌است (آلیوتا و کافیرو 1999). تحقیقات لیدون و همکاران (1997) در بررسی اثر آللوپاتیک درمنه بر روی تاج‌خروس، سلمه‌تره، سویا و ذرت بیان داشتند که درمنه روی این گونه‌ها اثر بازدارنده داشته و باعث کاهش وزن اندام­های هوایی و درصد رویش آنها می­شود. اسدی و همکاران (2016) با بررسی اثر آللوپاتیک پنج گونه گیاه دارویی بر علف هرز سلمه‌تره گزارش‌کردند که گیاهان آویشن، درمنه، بومادران، نعناع و مریم گلی به طور  معنی‌داری جوانه‌زنی سلمه‌تره را کاهش داد.

یکی از گیاهان دارویی که عصاره آن در این آزمایش مورد بررسی قرار گرفته‌است، مریم‌گلی دارویی است. مریم‌گلی ((Salvia officinalis L یک گیاه دارویی مهم می‌باشد و اثرات آللوپاتیک این گیاه بر روی برخی گیاهـان گـزارش شـده است. بخشهای هوایی مـریم‌گلـی دارای اثـرات آللوپاتیـک بـر  روی بـذرهای خیـار، کـدو و گوجـه فرنگـی بـوده و باعـث  کـاهش رشـد بخشهای هوایی و ریشه آنها می‌شود (قاسم 2001).

با توجه به مشکلات ناشی از حضور سس در مزارع و باغات، هدف از انجام تحقیق حاضر بررسی گیاهان دارویی مقاوم در برابر گسترش سس و استفاده از عصاره‌های آنها جهت کنترل جوانه‌زنی بذور سس بوده‌است.

 

مواد و روش­ها

این آزمایش در دو مرحله مختلف انجام پذیرفت. مرحله اول شامل دو بخش بود. اول آلوده‌سازی 17 گونه گیاه دارویی کشت شده در باغ گیاهان دارویی واقع در پارک اوتیسم در سال 97 و بررسی میزان آلودگی گیاهان به سس بود و بخش دوم 8 گیاه دارویی انتخاب شده از سال قبل که دارای مقاومت نسبی در برابر آلودگی به سس بودند، در مزرعه کشت شد و آلوده‌سازی آن­ها توسط انگل سس و بررسی میزان مقاومت به گیاهان مدنظر به آلودگی در برابر سس مورد بررسی قرار گرفت. مرحله دوم شامل عصاره‌گیری از گیاهان مقاوم در برابر سس به دو صورت عصاره آبی و هیدروالکلی و بررسی آنها بر جوانه‌زنی بذر سس بود. در قسمت آخر برخی خصوصیات فیتوشیمیایی گیاهان شامل میزان فنل و فلاونوئید کل و ترکیبات تشکیل دهنده اسانس بررسی‌شد.

 

1-شناسایی گیاهان دارویی مقاوم در برابر سس

در بخش اول این تحقیق در سال زراعی 97-96 در شهرستان تبریز، آلوده‌سازی گیاهان دارویی کشت‌شده در باغ گیاهان دارویی با بذر سس شامل: Matricaria chamomila  ، Humulus lupulus  ، Foeniculum vulgare ، Thymus vulgaris  ، Malva  sylvestris،  Rosa damascena، Rosmarinus officinalis ، Melissa officinalis ،Vitex agnus–castus ،Achilleae millefolium, Stachys schtschegleevii, Lippia Citrioodora, Mentha piperita, Galga officinalis, Artemisia absinthium, Hyssopus officinal,  انجام شد. دوره رشد همراه با تامین نیازهای اکولوژیک هر گیاه سپری شد و در این دوره شدت آلودگی به سس با در نظر گرفتن  تعداد بوته آلوده به تعداد کل بوته در هر کرت محاسبه گردید.

 

2-کشت گیاهان و آلوده سازی

در مرحله دوم، کشت گیاهان در طی سال زراعی 97 و 98 انجام‌پذیرفت. کشت در قالب طرح بلوک‌های کامل تصادفی با 3 تکرار در کرت‌هایی به ابعاد 6 متر مربع در مزرعه‌ای واقع در خسروشاه انجام شد. نشاهای گیاهان دارویی مورد آزمایش شامل: بادرنجبویه، زوفا، آویشن و مریم‌گلی که از دانشکده کشاورزی دانشگاه تبریز تهیه‌شده و و پایه های رازک نر و ماده (دوساله) و گل محمدی (سه ساله) که از قبل کشت گردیده‌بودند، در این آزمایش مورد استفاده قرار گرفتند. مشخصات فیزیکی و شیمیایی خاک در جدول 1 آمده است.

جهت تهیه بذور سس، از سس‌های رشد یافته بر روی خارشتر جمع‌آوری گردید. آلوده‌سازی گیاهان در طی مرحله رویشی انجام پذیرفت. میزان گسترش سس بصورت شمارش بوته‌های آلوده به سس صورت‌گرفت.

 

 

جدول 1- مشخصات فیزیکی و شیمیایی خاک مورد آزمایش

درصد اشباع

هدایت الکتریکی (dS.m-1)

pH

 

 

کربن آلی

(%)

نیتروژن (mg.kg-1)

فسفر

(mg.kg-1)

پتاسیم

(mg.kg-1)

شن

(%)

لای

(%)

رس

(%)

40

62/3

6/7

2/1

6/0

31

426

73

20

7

 

 

 

1-بررسی اثر آللوپاتی عصاره گیاهان دارویی بـر جوانه‌زنی و رشد سس

بررسی تأثیر عصاره‌های آبی و هیدروالکلی (اتانول 70 درصد) گیاهان دارویی (مریم‌گلی، رازک پایه ماده، زوفا و گل محمدی) در 4 سطح (صفر، 1، 5/7 و 15 درصد)  بر جوانه‌زنی بذور سـس در شـرایط کاشـت در پتریدیش بـه صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی در سه تکرار انجام شد. به منظور شکستن خواب بذرهای سـس، این بذرها پس از جمع آوری از روی گیاه خارشتر به عنوان میزبان و جدا کردن بذرهای سالم، ضدعفونی شده و برای شکستن خواب بذر سس از اسید سولفوریک 98 درصد استفاده‌گردید (جایاسوریا و همکاران 2008) (درصد جوانه‌زنی پس از اعمـال تیمـار حـدود 89 درصد). چهار میلی‌لیتر از عصاره آبی هر غلظت به صورت جداگانه بـه پتری‌دیش­های دارای کاغذ صافی اضافه و سپس تعداد 20 عـدد بـذر سس در هر یک از آنها قرار داده شد. پتری‌دیـش‌هـا در ژرمینـاتور و در دمای 30 درجه سانتی‌گراد قرار گرفتند. یادداشت برداری از جوانه‌زنی هر 24 ساعت یکبار انجام‌شد. برای محاسبه درصد و سرعت جوانه‌زنی از معادله‌های زیر استفاده‌شد (عالم و همکاران 2014).

GP=100×(𝑁𝑖 /𝑆)

معادله (1)

 


که در آن :GPدرصد جوانه‌زنی، :Niتعداد بذر جوانه‌زده در روز iام و :Sتعداد کل بذور کشت شده بود.

GR= Σ 𝑁𝑖/𝑇𝑖

معادله (2)

GR سرعت جوانه‌زنی بر حسب تعداد بذر در روز، :Niتعداد بذر جوانه‌زده در هر روز و :Ti تعداد روز از شروع آزمایش تا شمارش iام بود.

محتوای فنل کل عصاره­ها بر اساس میلی­گرم معادل اسیدگالیک بر گرم وزن خشک گیاه گزارش‌شد (سینگلتون 1965). اندازه‌گیری فلاونوئید کل نیز به روش چانگ و همکاران (2002) انجام‌شد.

اسانس­گیری به روش تقطیر با آب با استفاده از دستگاه کلونجر به مدت 4-3 ساعت انجام و درصد اسانس محاسبه‌شد. اجزای تشکیل‌دهنده اسانس و مقادیر آن با استفاده از دستگاه GC-MS مورد ارزیابی قرارگرفت. کروماتوگرافی گازی در این آزمایش از نوع Saturm مدل 3400 ستون DB-5 به طول 30 متر و قطر 25/0 میلیمتر و ضخامت لایه فاز ساکن 25/0 میکرولیتر بود. تجزیه و تحلیل داده‌های هر سه آزمایش با اسـتفاده از نـرم‌افـزار SPSS 22 و رسم نمودارها با استفاده از نرم افـزار Excel انجـام گرفت. میانگین‌ها با اسـتفاده از آزمـون چنـد دامنـه‌ای دانکـن مـورد مقایسه قرارگرفتند.

 

نتایج و بحث

1-شناسایی گیاهان دارویی مقاوم در برابر سس

بر اساس نتایج به‌دست‌آمده از مشاهدات میدانی، تعداد زیادی از گیاهان دارویی انتخاب شده،‌ شامل به‌لیمو، گل سرخ، مریم‌گلی دارویی، نعنا فلفلی، پنج انگشت، پولکی، گالگا، رزماری، زوفا و رازک ماده و بادرنجبویه هیچ گونه آلودگی به این انگل نشان‌ندادند. شکل یک نتایج حاصل از درصد آلودگی گیاهان دارویی مختلف به انگل سس را نشان‌می‌دهد.

 

 

شکل 1- نتایج حاصل از درصد آلودگی گیاهان دارویی مختلف به انگل سس

 

 

2-نتایج کشت و درصد آلودگی گیاهان دارویی به سس

بر اساس نتایج حاصل از مرحله اول آزمایش، 7 گیاه که در مرحله اول، پاسخ نسبتا مناسبی به مقاومت در برابر آلودگی سس داشتند، انتخاب و پس از آلودگی با بذور سس مورد کشت قرارگرفته و درصد بوته‌های آلوده به سس ارزیابی‌شدند.

 

 

 

 

شکل 2-مقایسه میزان آلودگی به سس در گیاهان کشت شده در مزرعه

 

 

نتایج به‌دست‌آمده حاصل از کشت و بررسی آلودگی گیاهان دارویی به سس نشان‌داد که رازک پایه نر، آویشن باغی و بادرنجبویه به ترتیب با 25، 61، 72 و 85 درصد بیشترین میزان آلودگی به سس را نشان‌دادند. همچنین رازک ماده، گل محمدی و زوفا هیچ آلودگی در برابر سس نداشتند. مریم‌گلی نیز با چهار درصد، میزان آلودگی کمی را نشان‌داد (شکل 2). لذا عصاره این 4 گیاه دارویی جهت بررسی تاثیر بر جوانه‌زنی بذر سس در مرحله بعدی مورد ارزیابی قرار گرفتند.

 

3- نتایج بررسی تاثیر آللوپاتی عصاره‌های گیاهان دارویی بر جوانه‌زنی بذر سس

نتایج به‌دست‌آمده از تاثیر غلظت­های مختلف عصاره آبی و هیدروالکلی گیاهان دارویی مورد استفاده در این آزمایش نشان داد که تاثیر نوع عصاره‌ها معنی‌دار بوده و عصاره هیدروالکلی میزان بازدارندگی بیشتری نسبت به عصاره آبی بر جوانه‌زنی بذر سس داشت و 4 غلظت استفاده شده اختلاف معنی­داری از نکته نظر  تاثیر  بر درصد جوانه‌زنی و سرعت جوانه‌زنی و میانگین روز لازم برای آغاز جوانه‌زنی بذور داشت به طوری که در تیمار شاهد بیشترین میزان جوانه‌زنی و در تیمار 15 درصد عصاره ها کمترین جوانه‌زنی بذور سس مشاهده‌گردید. از بین گیاهان دارویی مورد استفاده جهت عصاره‌گیری، رازک ماده بیشترین تاثیر را بر بازدارندگی جوانه‌زنی سس داشت و مریم‌گلی کمترین تاثیر را نسبت به گیاهان دیگر نشان داد. اثر متقابل نوع و غلظت عصاره‌های مختلف به کار برده‌شده معنی‌دار نبود. همان‌طور که در شکل 3 آمده‌است، تیمار شاهد (آب مقطر) بیشترین درصد جوانه‌زنی بذر سس را داشت (89 درصد). عصاره هیدروالکلی 15 درصد رازک ماده با 13 درصد جوانه‌زنی نسبت به سایر غلظت‌ها تاثیر بهتری بر بازدارندگی از جوانه‌زنی بذر سس نشان‌داد. عصاره 15 درصد هیدروالکلی گل محمدی با 2/18 درصد جوانه‌زنی بذر سس نتیجه مطلوبی بر کنترل بذر سس داشت و عصاره هیدروالکی 15 درصد مریم‌گلی و زوفا نیز با 6/24 و 1/42 درصد جوانه‌زنی بذور سس نتایج بهتری نسبت به سایر غلظت‌های عصاره­های به کار برده‌شده نشان‌دادند (شکل 3)

 

 

 

 

 

شکل 3-تاثیر عصاره‌های آبی و هیدروالکلی رازک ماده، گل محمدی و مریم‌گلی دارویی، زوفا، در غلظت‌های

مختلف بر درصد جوانه‌زنی بذور سس

 

 

 

4-نتایج میزان فنل و فلاونوئید کل در عصاره‌های گیاهان دارویی

نتایج حاصل از تجزیه واریانس اندازه گیری میزان فنل و فلاونوئید کل عصاره‌های به‌کار رفته در این آزمایش نشان‌داد که تاثیر نوع عصاره، نوع گیاه و غلظت عصاره‌های به‌کار رفته و اثر متقابل آنها معنی‌دار می‌باشد. بیشترین میزان فنل کل در عصاره 15 درصد هیدروالکلی گل محمدی (79.8 میلی گرم گالیک اسید در گرم وزن خشک) و کمترین میزان فنل کل از عصاره یک درصد مریم‌گلی (14.7 میلی گرم گالیک‌اسید در گرم وزن خشک) به‌دست‌آمد. بیشترین میزان فلاونوئید در بکارگیری عصاره 15 درصد هیدروالکلی رازک ماده (52.3 میلی گرم کوئرستین در گرم وزن خشک) و کمترین میزان آن در عصاره آبی 1 درصد گل محمدی (4.3 میلی گرم کوئرستین در گرم وزن خشک) بود (جدول 2).

 

 

جدول 2. میزان فنل و فلاونوئید کل عصاره‌های گیاهان دارویی

فلاونوئید کل (میلی گرم کوئرستین در گرم وزن خشک)

فنل کل (میلی گرم گالیک اسید در گرم وزن خشک)

غلظت عصاره

نوع گیاه

نوع عصاره

p7.4

p21.4

1

گل محمدی

هیدروالکلی

j28.7

j42.8

7.5

 

 

c45.6

c79.8

15

 

 

q5.6

q18.7

1

زوفا

 

k23.1

k33.3

7.5

 

 

d41.8

d67.3

15

 

 

q5.5

q14.7

1

مریم گلی

 

l22.3

l25.6

7.5

 

 

e38.3

e65.2

15

 

 

p6.9

p20.7

1

رازک

 

j28.2

j43.5

7.5

 

 

a51.3

a78.8

15

 

 

r4.3

r18.3

1

گل محمدی

آبی

n19.4

n34.6

7.5

 

 

f36.8

f62.3

15

 

 

r4.5

r12.6

1

زوفا

 

o16.9

o26.3

7.5

 

 

g35.2

g51.9

15

 

 

r4.7

r10.1

1

مریم گلی

 

o16.7

o19.5

7.5

 

 

i30.1

i50

15

 

 

q5.8

q18.5

1

رازک

 

m20.3

m34.8

7.5

 

 

b52.3

b59.8

15

 

 

 

 

 

5-نتایج ترکیبات تشکیل‌دهنده اسانس گیاهان مختلف

نتایج حاصل از آنالیز اسانس گیاهان دارویی کشت شده توسط دستگاه GC-MS  نشان داد که عمده ترکیبات تشکیل دهنده اسانس گیاه گل محمدی نونادکان و هنیکوزان می باشد. در حالی‌که ترکیب عمده اسانس گیاه رازک آلفا-هومولن و بتا-میرسن بوده‌است. همچنین ترکیب عمده تشکیل دهنده اسانس مریم‌گلی دارویی آفا-توجون و گیاه زوفا پینوکامفون بود (شکل 4).

 

 

 

شکل 4. نتایج آنالیز اسانس رازک ماده، زوفا، گل محمدی و مریم گلی دارویی

 

 

در گیاهان ترکیبات آلی مختلفـی وجـود دارد کـه دارای خاصیت آللوپاتی، در همه بافت­های گیاهی از جمله برگ­ها، ساقه‌ها، ریشـه‌هـا، ریزوم‌ها، گل‌ها، میوه‌ها و دانه‌ها می‌باشند (حجازی و همکاران 2001). این مـواد مسـموم‌کننده گیاهان که آللوکمیکال نامیده‌می‌شوند، فرآورده‌های حاصل از مسیرهای متابولیکی اصلی گیاه هستند که به هنگام تجزیـه بقایـای گیـاهی، از طریـق ترشحات ریشه‌ای، تبخیر و آبشویی بـه محـیط آزاد مـی‌شوند (پیرزاد و همکاران 2012). گیاهان دارویی آللوکمیکال‌های مختلفی از جمله؛ ترکیبات فنولی، آلکالوئیدها، اسیدهای چرب، ترپنوئیدها و فلاونوئیدها کربوهیدرات­ها، آلکالوئیدها، کومارین‌ها و استرول‌هادر مقادیر کم در محیط آزاد می‌کنند (چانگ و همکاران 2001؛ جان و سارادا 2012). بازداری جوانه‌زنی بذور علف‌های هرز به علت تاثیرات سینرژیک بسیاری از این آللوکمیکال‌هاست. ترکیبات فنولی از مهم‌ترین و رایج ترین آللوکمیکال‌ها در طبیعت به شمار می‌روند و دارای گروه هیدروکسیل متصل به هیدروکربن­های آروماتیک هستند (ژنگ و همکاران 2008). ترکیبات فنولی بر تعادل یونی، میزان فیتوهورمون‌ها، آنزیم‌ها، فتوسنتز و تنفس تاثیر‌می‌گذارد. در حقیقت ترکیبات مختلف موجود در گیاهان دارویی بصورت سینرژیستی بر فرایندهای مختلف تاثیر‌می‌گذارند.

تاثیر آللوکمیکال‌ها بر جوانه‌زنی بذور علف هرز می‌تواند به دلیل تاثیر بر سنتز هورمون، تقسیم سلولی، آنزیم‌ها، نفوذپذیری غشای سلولی، سنتز پروتئین‌ها باشد (رایس 1984).

گروه فنولی آللوکمیکال‌ها می توانند با جلوگیری از رشد طولی ریشه، تقسیم سلولی ساختار سلول را تغییر و در جوانه‌زنی و رشد علف های هرز اختلال ایجاد کنند (کروز و همکاران 1998)، لذا در ساختار علف‌کش­ها، حشره‌کش‌ها و قارچ‌کش­ها حضور دارند.

هورمون‌های گیاهی نقش مهمی در تنظیم رکود و جوانه‌زنی بذور داشته و ABA محرک و القا کننده رکود بذر و بازدارنده جوانه‌زنی است. GA3 رکود بذر را کاهش و با سنتز آمیلاز، برخلاف ABA جوانه‌زنی را تحریک‌می‌کند (فوجیوکا و همکاران 1986). ارز و فیدان (2015) تاثیر آللوپاتیکی عصاره مریم‌گلی کبیر را بر جوانه­زنی بذر خرفه و میزان فعالیت آمیلاز، پروفایل پروتئین، مقادیر فیتوهورمون ها مورد بررسی قراردادند. طبق یافته های ارز و فیدان، افزایش غلظت عصاره مریم‌گلی موجب کاهش غلظت ABA در بذور خرفه گردید، درحالی‌که در غلظت­های پایین عصاره میزان جیبرلیک اسید در حین جوانه‌زنی افزایش نشان‌داد. لذا می‌توان گفت که غلظت‌های مختلف عصاره مریم‌گلی با تاثیر بر مقادیر و نسبتهای ABA و GA3 بر فعالیت آلفا آمیلاز تاثیر گذاشته‌است. تاثیر بر کاهش جوانه‌زنی بذر سس ممکن‌است به علت کاهش میزان آمیلاز در بذور در حال جوانه‌زنی با اختلال در فعالیت آنزیم‌هایی مانند آلفا آمیلاز باشد (عالم و اسلام 2002).

ترکیبات عمده تشکیل‌دهنده اسانس‌ها در نمودار نشان داده‌‌شده‌‌است. ترکیبات عمده موجود در اسانس این گیاهان مونوترپن­ها هستند که که دارای فعاللیت فیتوتوکسیک هستند (د آلمیدا و همکاران 2010). وکو و همکاران (2003) فعالیت آللوپاتیکی 47 گروه مونوترپنوئیدی را بر جوانه­زنی و رشد گیاهچه کاهو بررسی کردند که بیشترین ترکیبات موثر شامل کتون-ها، الکل­ها، آلدئیدها و فنول­ها بود. فعالیت فیتوتوکسیک مونوترپن‌ها می تواند منجر به تغییرات آناتومی و فیزیولوژیکی گیاهچه­ها و تجمع گویچه‌های چربی در سیتوپلاسم و نهایتا کاهش اندامک‌هایی نظیر میتوکندری و نهایتا جلوگیری از سنتز DNA یا اختلال در غشاهای میتوکندری و هسته می‌شود (نیشیدا و همکاران 2005).

با توجه به اینکه هیستوریوم‌های سس به درون آوند آبکش نفوذ می‌کند و شیره پرورده حاوی متابولیت­های اولیه و ثانویه را جذب می‌کند، مواد موثره موجود در گیاهان دارویی از پتانسیل خوبی جهت کنترل آلودگی سس می‌تواند داشته‌باشد. با توجه به نتایج حاصل از این آزمایش، عصاره‌های بکار رفته دارای مقادیر بالایی ترکیبات فنولی بوده و پتانسیل خوبی جهت کنترل علف هرز سس می‌باشند. به ویژه اندام مورد استفاده رازک و گل محمدی که پیکر رویشی بوده و جزو ضایعات گیاهی محسوب‌می‌شوند، می توانند جهت تولید علفکش­های زیستی در آینده بیشتر مورد بررسی و استفاده قرار گیرند.

 

نتیجه گیری کلی

نتایج حاصل از پژوهش حاضر نشان می‌دهد که مقاومت گیاهان دارویی در آلودگی به سس بسیار متفاوت‌‌بوده و امکان استفاده از عصاره گیاهان دارویی مقاوم در بحث مبارزه بیولوژیک با سس  فراهم‌ می‌باشد. با تاکید بر اینکه در مورد رازک و گل محمدی که بالاترین اثر آللوپاتی را در این پژوهش به خود اختصاص داده اند، عصاره از اندام هوایی این دو گیاه ، که به عنوان محصول اصلی دارویی مدنظر نیستند (تنها از گل‌های آنها استفاده دارویی می‌شود)، استفاده شده است. ضمن اینکه با توجه به ساختار این دو‌گیاه استفاده از رازک و گل محمدی در حصارکشی دور مزرعه برای مبارزه با آلودگی محصولات استراتژیک به سس نیز امکانپ‌ذیر می‌باشد.

     

سپاسگزاری

از جناب آقای مهندس امیرحسین طالب‌پور، عضو مرکز تحقیقات کشاورزی و منابع طبیعی آذربایجان‌شرقی به جهت همکاری ایشان در راستای انجام مراحل ابتدایی این آزمایش کمال تشکر و سپاس را داریم.

Alam A, Juraimi AS, Rafii MY, Abdul Hamid A and Aslani F. 2014. Screening of purslane (Portulaca oleracea L.) accessions for high salt tolerance. The Scientific World Journal, 1-14.
Alam SM, Ala SA, Azmi AR, Kan MA and Ansari R. 2001. Allelopathy and its role in agriculture. Journal of Biology and Science, 1(5): 308-315.
Aliotta G and Cafiero G. 1999. Biological properties of Ruta graveolens and its potential use in sustainable agricultural systems. 551-563, In: Dakshiny K.M.M. and Foy C.L., (eds.), Principles and Practice in Plant Ecology. CRC Press Boca Raton FL., 608p.
Alipour Sh, Farshadfar E and Binesh S. 2012. Allelopathic effects of Yarrow (Achilla millefalium) on the weeds of corn (Zea mays L.). European Journal of Experimental Biology, 2 (6):2493-2498.
Amiri I, Hamrouni L, Hanana M and Jamoussi B. 2012. Herbicidal potential of essential oils from three mediterranean trees on different weeds. Indian Journal of Allelopathy, 8: 3-12.
Arminante F, De Falco E, De Feo V, De Martino L, Mancini E and Quaranta E. 2006. Allelopathic activity of essential oils from mediterranean Labiatae family plants. Acta Horticulturae, 723: 347-356.
Asadi Gakieh M, Babaei Ghaghelestany A and Pour Pilevar F. 2016. Deterrent efficacy of the extract from five medicinal plants spices on germination and seedling growth of Chenopodium album. Journal of Seed Research, 6 (4): 72- 79. (In Persian).
Chang C, Yang M, Wen H and Cher J. 2002. Estimation of total flavonoid content in propolis by two complementary colorimetric methods. Journal of Food and Drug Analaysis, 10: 178-182.
Chung I, Ahn M and Yun SJ. 2001. Identification of allelopathic compounds from rice (Oryza sativa L.) straw and their biological activity. Canadian Journal of Plant Sciences, 81: 815-819.
Dayan FE and Duke SO. 2014. Natural compounds as next generation herbicides. Plant Physiology, 166: 1090–1105.
Erez M and Fidan M. 2015. Allelopathic effects of Sage (Salvia macrochlamys) extract on germination of Portulaca oleracea seeds. Allelopathy journal, 35(2): 285-296
Fujioka S, Sakurai A, Yamaguchi I, Murofiishi N, Takahashi N, Kaihari S, Takimota A and Cleland CF. 1986. Flowering and endogenous levels of plant hormones in Lemna species. Plant Cell Physiology, 27:151-160.
Gliessman SR. 2001. Agroecosystem Sustainability: Developing Practical Strategies. CRC Press, Boca Raton, Florida.
Jarchow ME and Cook BJ. 2009. Allelopathy as a mechanism for the invasion of Typha angustifolia. Plant Ecology, 204: 113-124
Halevy AH. 1989. Handbook of Flowering, Volume 6. CRC Press. Inc. PP.776.
Hejazi A, Ghaffari CM and Hosseinimazinani CM. 2001. Investigating the possibility of allelopathic effect of root wheat, cotton and sunflower on various stage of growth and yield of sunflower. Pajohesh-va-sazandegi, 51: 88-93. (In Persian).
Inderjit and Nilsen ET. 2003. Bioassays and field studies for allelopathy in terrestrial plants: progress and problems. Critical Reviews in Plant Sciences, 22: 221-238.
Jayasuriya KMGG, Baskin JM, Geneve RL, Baskin CC and Chien CT. 2008. Physical dormancy in seeds of the holoparasitic angiosperm Cuscuta australis (Convolvulaceae, Cuscuteae): dormancy breaking requirements, anatomy of the water gap and sensitivity cycling. Annals of Botany, 102: 39-48.
Lydon J, Teasdale JR and Chen PK. 1997. Allelopathic activity of annual worm wood (Artemisia annua) and the role of artemisinin. Weed Science, 45: 807-811.
Machado S. 2007. Allelopathic potential of various plant species on downy brome: Implications for weed control in wheat production. Agronomy Journal, 99(1): 127-132.
Meighani F, Khalghani J, Baghestani MA and Najafpour M. 2007. Allelopathic potential of Trifolium resupinatum L. (Persian clover) and Trifoliumalexandrium L.(Berseem clover). Weed Biology and Management, 7: 178–183.
Morris C, Grossl PR and Call CA. 2009. Elemental allelopathy: processes, progress and pitfalls. Plant Ecology, 202: 1-11.
Mullen RJ, Orr JP, Viss TC and Whiteley SW. 1998. A three year study on dodder management with rimsulfuron. Pages 76–78 in Proceedings of the Western Society of Weed Science. Newark, CA : Western Society of Weed Science.
Nadler-Hassar T and Rubin B. 2003. Natural tolerance of Cuscuta campestris to herbicides inhibiting amino acid biosyntesis. Weed Research, 43: 341-347.
Rashed Mohasel MH, Najafi A and Akbarzadeh MD. 2002. Weed biology and control. (first ed.). Ferdowsi University Press. (In Persian).
Narwal SS, Palaniraj R and Sati SC. 2005. Role of allopathy in crop production. Herbologia,
6:2: 121-135
Nir E, Rubin B and Zharasov S. W. 1996. On the biology and selective control of field dodder (Cuscuta campestris). p. 809-816. In: M.T. Moreno, J.I. Cuberu, D. Berner, D. Joel, L.J. Musselman, and C. Parker (eds.). Advances in Parasitic Plant Research.
Ohno K, Minami T, Matsui Y and Magara Y. 2008. Effects of chlorine on organophosphorus pesticides adsorbed on activated carbon: Desorption and oxon formation. Water Research, 42: 1753-1759.
Omidbeigi R. 1997. Approaches to Production and Processing of Medicinal Plants. Tarrahan-e nashr publication, Tehran. Iran. 423 pp. (In Persian).
Peterson J and Rover A. 2005. Comparison of sugar beet cropping systems with dead and living mulch using a glyphosate-resistant hybrid. Journal of Agronomy and Crop Science, 191: 55-63.
Pirzad A, Ghasemian V, Seyedsharifi R, Sedighi M and Hadi H. 2012.  Effect of water extracts of Salvia officinalis and Artemisia sieberi on seed germination and seedling growth of Amaranthus retroflexus. Journal of Plant Protection, 26(2): 145-151. (In Persian).
Qasem JR. 2001. Allelopathic potential of white top and Syrian sage on vegetable crops. Agronomy Journal, 93: 64-71.
Rice EL. 1984. Allelopathy, 2nd Ed. Florida: Academic Press, 424 p
Seigler DS. 1996. Chemistry and mechanism of allelopathic interaction. Agronomy Journal, 88: 876-885.
Singleton VL and Rossi JA. 1965. Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungtic acid reagent. American Journal of Enology and Viticulture, 16(3): 144-58.
Vaughn KC. 2002. Attachment of the parasitic weed dodder to the host. Protoplasma, 219. 227–237.
Wallace J. 2001. Organic field crop handbook. 2nd Ed. Canadian organic Growers Inc., Ottawa, Canada
Zeng RS, Mallik AU and Luo SM. 2008. Allelopathy in Sustainable Agriculture and Forestry; Springer Science+Business Media, LLC, New York, USA.